Fenol Kırmızısı Olmayan Swe Rekombinant Tripsin-EDTA Çözeltisi

Tripsin, polipeptit zincirlerindeki lizin ve argininin karboksil terminalini kesebilen bir serin hidrolazdır. Tripsin sindirimleri, hücreler arası proteinleri hidrolize etmek ve dokuları veya hücreleri ayrı ayrı hücrelere ayırmak için doku hücresi ekstraksiyonunda, kültüründe ve in vitro hücre kültüründe kullanılır. Geleneksel trypsin, domuz ve inek gibi hayvanların pankreasından elde edilir. Geleneksel pankreatik enzimlerin kökeni ve üretim sürecinin özellikleri, bunların kaçınılmaz olarak hayvan kökenli safsızlıklar ve potansiyel viral kontaminasyon içerdiği anlamına gelir. Bu ürün, geleneksel trypsin yerine rekombinant domuz trypsinini kullanır. Üretim sürecinde hiçbir hayvan kaynaklı ham madde kullanılmaz ve rekombinant domuz tripsininin saflığı ve yaşayabilirliği, birden fazla saflaştırma turuyla sağlanır. Bu, yalnızca geleneksel trypsinin işlevinin yerine geçmesine değil, aynı zamanda hayvansal kökenli olmayan menşein kesinlikle gerekli olduğu özel hücrelerin veya dokuların sindirimi için de kullanılmasına olanak tanır. Ayrıca ürün EDTA içerir, fenol kırmızısı indikatörü içermez.

Islak buzla gemi; 12 ay boyunca ışıktan 4 derece uzakta saklayın. Ürün kısa süre kullanılmayacaksa -20 derecede daha uzun süre saklanması tavsiye edilir.

Not: Aşağıdaki protokoller esas olarak yapışık hücreler için kullanılır. Doku sindirimi için öncelikle dokunun uygun boyutlarda kesilmesi gerekir. Sindirim için gereken süre dokudan dokuya büyük ölçüde değişir ve genellikle dokuların sindirimden sonra yeterince parçalanması tavsiye edilir.

1. Orijinal hücre kültürü ortamını çıkarın ve kalan serumu çıkarmak için hücreleri 1-2 kez PBS, serumsuz ortam veya diğer tamponlarla yıkayın.

2. Hücreleri kaplamak için uygun miktarda rekombinant trypsin sindirim çözeltisi ekleyin ve çoğu hücrenin sindirim süresinin 30 saniye-3 dakika arasında olduğunu gözlemlemek için mikroskop altında sindirim yapın; Sindirilemeyen hücreler için, belirli bir süre boyunca sindirilmek üzere hücre kültürü inkübatörüne yerleştirilebilir (sindirim süresi yalnızca referans amaçlıdır, spesifik sindirim süresi fiili duruma göre belirlenmelidir).

3. Hücreler önemli büzülme veya morfolojik değişiklikler gösterdiğinde, sulandırılmış trypsin sindirimini aspire edin ve sindirimi sonlandırmak için uygun miktarda serum içeren hücre kültürü ortamı ekleyin (hücrelerin plakanın tabanından hafifçe üflendiğinde yerinden çıkması zorsa). pipetleme, sindirim süresinin yetersiz olduğunu ve sindirimin, trypsin hücre sindirimi eklenerek devam ettirilebileceğini gösterir. Aşırı sindirimden kaçının).

4. Hücre süspansiyonunu bir santrifüj tüpüne toplayın, 800-1200 rpm/dakika hızında 3-5 dakika boyunca santrifüjleyin, uygun miktarda serum içeren hücre kültürü ortamı ekleyin (isteğe bağlı).

5. Geçiş veya sonraki deneyler için kullanılabilecek hücre süspansiyonu yapmak için hücreleri yavaşça üfleyin.

1. Bu ürün doğrudan 4 derecede hücre sindirimi için kullanılabilir. Sindirim sıcaklığı ihtiyaca göre oda sıcaklığında veya inkübatörde seçilebilir, ancak lütfen ürünü doğrudan 37 derecede ısıtmayın. Sıcaklığın tekrarlanan yükselişi ve düşüşünün enzim aktivitesi üzerinde belirli bir etkisi vardır.

2. Ürün teslim alındıktan sonra gerektiği gibi porsiyonlar halinde saklanabilir; -20 derecede saklamanız gerekiyorsa tekrar tekrar dondurup çözdürmekten kaçının.

3. Sindirim süresi hücre hatları veya dokular arasında farklılık gösterir; bu nedenle hücre aktivitesini ve durumunu etkileyebilecek aşırı sindirimin çok uzun süre olmasını önlemek için lütfen optimum sindirim süresini kontrol edin.

4. Bu ürün aseptiktir ve kullanıma hazırdır ve mikoplazma ve endotoksin açısından test edilmiştir. Lütfen kullanım sırasında aseptik çalışmaya dikkat edin.

5. Sağlığınız ve güvenliğiniz için lütfen çalışırken laboratuvar önlüğü ve eldiven giyin.

Yalnızca Araştırma Kullanımı İçindir!

Popüler Etiketler: fenol kırmızısı olmadan swe rekombinant trypsin-edta çözeltisi, Çin fenol kırmızısı olmadan swe rekombinant trypsin-edta çözeltisi üreticiler, tedarikçiler, fabrika